植物红细胞凝集素单体的纯化工艺

植物红细胞凝集素，学名Phytohemagglutinin-E （PHA-E)，参考产品为Sigma公司产品，货号为L8629。 凝集素是从豆科植物种子中提取的一种含糖蛋白质，植物凝集素具有刺激外周血淋巴细胞RNA合成和有丝分裂，促进免疫反应，使细胞凝聚，肿瘤细胞失活，以及诱发人外周血淋巴细胞产生抗癌淋巴因子等生物学活性。PHA是由E、L两种亚基组成的四聚体蛋白质的混合物，按其亚基组成可分为L4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性质和不同生物学活性的同工凝集素。其中红细胞凝集素（Erythrohemagglutinin ，PHA-E）含有4个相同的E亚基，具有最强的红血球凝集功能，没有白细胞凝集能力。 产品-红细胞凝集素是由英国红芸豆（俗称红腰豆，属于常见杂粮）为原料，采用亲和纯化技术制备得到，属于植物提取蛋白质，产品为白色粉末，安全无毒。目前，红细胞凝集素主要作为体外诊断试剂的重要组成部分，应用于去除临床血液样本中的红细胞。使得最终检验结果快速准确，有效避免了传统采用离心方法分离血浆和红血球中出现的细胞破裂等问题，因此近年来广泛用于临床和科研上凝集去除血液中的红细胞。 我们建立了一套低成本快速的分离纯化工艺，能特异性纯化得到PHA-E，同时生产成本能下降至进口同类商品售价的5%以下。该工艺不需要太多设备，普通实验室即可完成200mg-1000mg规模生产。产品质量已经得到国外公司的肯定。目前国内尚无该产品销售。